022130 緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養基)

　　(MR-VP Medium)

　　用 途：

　　緩沖葡萄糖蛋白胨水用于MR和VP試驗(GB 4789.30-2010，SN0169-92和《中華人民共和國藥典》2010年版)。

　　原 理：

　　多胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵的糖類;磷酸氫二鉀是緩沖劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓。

　　甲基紅(MR)試驗：腸桿菌科的細菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖，產生丙酮酸，丙酮酸再被分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸。大腸桿菌分解丙酮 酸，次生的酸類較多，pH為4.5或更低，甲基紅呈現紅色(陽性)。在產氣桿菌的培養液中一部分丙酮酸變為中性的乙酰甲基甲醇，生成的酸類較少，pH在5.4以上，甲基紅呈現桔黃色(陰性)。

　　乙酰甲基甲醇生成試驗(V—P試驗)：細菌發酵葡萄糖生成丙酮酸，某些細菌可使丙酮酸脫羧形成乙酰甲基甲醇。在堿性溶液中，乙酰甲基甲醇可在空氣中氧化成二乙酰(丁二酮)。二乙酰再與蛋白胨中精氨酸的胍基作用，生成紅色化合物。試驗中加入α—萘酚是作催化劑，使反應的顏色加深，提高反應的敏感性。

　　緩沖葡萄糖蛋白胨水配方(每升)：

　　磷酸氫二鉀 5g

　　多胨 7g

　　葡萄糖 5g

　　最終pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、稱取本品17g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝試管每管1mL，121℃高壓滅菌15min。

　　2、甲基紅(MR)試驗

　　A：取少量待檢菌的新鮮純培養物接種本培養基中，于36±1℃培養2—5d，

　　哈夫尼亞菌則應在22—25℃培養。

　　B：48h取出部分培養液，滴加(029040)甲基紅試劑三滴，立即觀察結果。鮮紅色為陽性，黃色為陰性。

　　3、V—P試驗

　　A：取待檢菌的新鮮純培養物接種本培養基中，于36±1℃培養2—4d， 哈夫尼亞菌則應在22—25℃培養。

　　B：48h后取出部分培養液，按順序加入1/2培養液體積的(029050)VP試劑甲液和1/5體積的乙液充分搖勻試管，觀察結果。陽性者應立刻或數分鐘內出現紅色，如為陰性，應放在36±1℃下培養4h后再進行觀察。

　　質量控制：

　　本品接種后于36±1℃培養48h，滴加試劑，生化特征如下：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規 格：250g

　　參考文獻：

　　1.GB/T4789.4-2003 中華人民共和國國家標準食品衛生微生物檢驗 沙門氏菌檢驗

　　2.GB/T4789.28-2003中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 染色法，培養基和試劑

　　3.GB/T4789.4-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 沙門氏菌檢驗

　　4.GB/T4789.38-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 大腸桿菌計數

　　5.GB/T4789.30-2010 中華人民共和國國家標準 食品安全國家標準 食品衛生微生物檢驗 大腸桿菌計數

　　6.《中華人民共和國藥典》2010年版 附錄XI J 微生物限度檢查。

　　7. SN/T 0184-93 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 進出口食品中單核細胞增生李斯特氏菌檢驗

　　8. SN/T 0184.1-2005 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 進出口食品中單核細胞增生李斯特氏菌檢驗

　　9. SN 0169-1992中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法